同时检测新甲型H1N1及人季节性H1N1和H3N2流感病毒的单管多重荧光定量PCR方法

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1中国疾病预防控制中心,病毒病预防控制所,病毒基因工程国家重点实验室,北京,100052

2北京市疾病预防控制中心传染病地方病控制所,北京,100013


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本研究设计的一种4重荧光定量RT-PCR检测方法,以A型流感病毒各亚型的血凝素基因(HA)为检测靶标,实现了同时检测新甲型H1N1流感病毒、人季节性H1N1流感病毒和人季节性H3N2流感病毒.本法使用人细胞RNA酶P基因作为内参,以判断标本来源和实施质量控制.利用不同来源和哑型的流感病毒验证了该方法的特异性;利用连续稀释的新甲型H1N1流感病毒HA全基因体外转录物进行灵敏度分析.结果表明该方法灵敏度高,可检测低至20个拷贝的RNA;特异性强,每对引物只检测出对应的病毒,无交叉反应;并且成功地验证性检验了34份新甲型H1N1流感病毒阳性临床标本和20份人季节性H1N1和H3N2流感病毒及人乙型(HB)流感病毒阳性临床标本.因此,该多重荧光定量RT-PCR法是一种可同时检测2009年新甲型流感病毒及季节性流感病毒的有效方法.

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基金传染病防治重大专项(2009ZX10004-101;2008ZX10004-002;2008ZX10004-001;...

关键词新甲型H1N1 实时定量PCR 多重检测


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